Анализ пцр на гепатит с

Содержание

Анализ ПЦР гепатита С (РНК гепатита С, HCV RNA), качественное и количественное исследование

Анализ ПЦР на гепатит САнализ РНК HCV (определение РНК вируса гепатита С), часто называемый анализ ПЦР гепатита С — это исследование крови, позволяющее выявить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус — это одна частица РНК).

Этот тест чаще всего выполняется методом ПЦР, — отсюда и название ПЦР гепатита С. Существуют качественный и количественный анализы на РНК ВГС.

Качественный анализ указывает на наличие вируса в крови. Данный тест необходимо проводить всем пациентам, у кого обнаружены антитела к гепатиту С.

Его результат может быть «обнаружено» или «не обнаружено». Референсные значения (значение, которое должно быть в норме) — «не обнаружено». Результат «обнаружено» может свидетельствовать о том, что вирус размножается и инфицирует все новые клетки печени.

Качественный тест ПЦР имеет определенную чувствительность (10-500 МЕ/мл.). Это означает то, если вирус присутствует в крови в очень малой концентрации (ниже порога чувствительности метода), может быть получен результат «не обнаружено».

Поэтому, при проведении качественного ПЦР у пациентов с низкой виремией (концентрацией вируса), например, проходящих противовирусную терапию, важно знать чувствительность диагностической системы.

Для контроля вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии желательно использовать диагностическую систему с чувствительностью не ниже 50 МЕ/мл. Таким критериям соответствуют, например, анализаторы COBAS AMPLICOR ВГС-TEST (аналитическая чувствительность 50 МЕ/мл или 100 копий/мл), РеалБест РНК ВГС (аналитическая чувствительность 15 МЕ/мл или 38 копий/мл) и другие.

Где безопасно купить новые препараты для лечения гепатита C ? HCV24 ACCESS PROGRAM — ваш верный курс на выздоровление! На все заказы действует расширенная гарантия: 100% излечение или возврат средств.

Стоимость пцр

ПЦР анализ, стоимость которого зависит от применяемых реактивов, и может составлять от 300 руб. до 5000 руб., выполняется от одних суток до недели.

Кроме метода ПЦР для выявления РНК ВГС также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.

Как часто нужно делать ПЦР гепатита C? Обычно его проводят сразу после обнаружения антител к гепатиту C и после 4-й, 12-й, 24-й недели противовирусной терапии, а также через 24 недели после завершения ПВТ, а затем — ежегодно, в случае УВО.

Рис. 1. Пример результатов качественного ПЦР гепатита С.

Количественный анализ ПЦР (вирусная нагрузка) — это тест на концентрацию вируса (виремию) в  крови.

Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру).

Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл.

В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 МЕ/мл = 4 копии/мл, например, 5.5* 105 МЕ/мл = 2.2* 106 копий/мл.

Важно знать, что не существует прямой связи между концентрацией вируса в крови и тяжестью гепатита С.

На что же влияет вирусная нагрузка?

Во-первых, на инфекционность. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус, например, при половых контактах или вертикальным путем. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения (если лечение будет проводиться на основе интерферона).

Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным. Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении интерфероновой терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса.

Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.

Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?

Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *103 или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*104 или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*107 ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.

Как часто нужно делать количественный тест?

Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.

Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».

Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл.

Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК.

Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).

Рис.2 Пример результатов количественного теста.

Источник: http://www.hv-info.ru/gepatit-s/analizy/pcr.html

Качественный анализ на гепатит С

Качественный анализ на гепатит С

Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус. В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям.

Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности.

В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

Термином РНК вируса гепатита С (или вирус гепатита С РНК) называется само заболевание печени. Вирус С связывается со здоровой клеткой организма, проникая внутрь. Со временем разносится по всему организму, стоит только ему попасть в кровь.

В итоге возбудитель проникает в печень, сращивается с ее клетками и усиленно работает. Печеночные клетки (гепатоциты) работают под его воздействием, претерпевая изменения, и от этого гибнут. Чем дольше вирус С находится в печени, тем большее количество клеток гибнет.

Со временем развиваются опасные болезни, приводящие к злокачественному перерождению и летальному исходу.

Заражение печени этой разновидностью вируса может никак не проявляться внешне. Долгие годы или десятки лет зараженный человек чувствует себя абсолютно здоровым, и только случайное обследование чаще всего и выявляет патологию.

При сдаче крови на гепатит исследуется часть цепочки РНК (рибонуклеиновой кислоты), входящей в состав человеческого гена (ДНК). Результаты лабораторного исследования не стоит использовать для самолечения, ведь это только показатель.

Точную картину и дальнейшую диагностику лучше определит врач.

Когда делается: показания к исследованию

В подтверждение ВГС назначается анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция). Исследования ПЦР помогают найти материал возбудителя в структуре РНК и назначить эффективную терапию. Назначается в следующих случаях:

  • выявление признаков воспаления печени;
  • скрининговые исследования с целью профилактики;
  • обследование контактирующих людей;
  • диагностирование гепатитов смешанного происхождения (определение главного возбудителя);
  • определение уровня активности размножения вируса при хронической форме;
  • цирроз печени;
  • для определения эффективности назначенного лечения.

Исследования ПЦР назначает врач для определения эффективности курса лечения гепатита.

Существует качественный, а также количественный анализ ПЦР. Количественный ПЦР показывает процентное соотношение РНК с носителями вируса в крови, а качественный указывает на вирусное присутствие либо отсутствие. Положительный показатель качества (присутствия РНК гепатита С) нуждается и в количественном исследовании.

Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита С сопряжена с риском его передачи, то есть заражения окружающих. Низкие показатели количества лучше поддаются лечению. Количество РНК-вирусов в составе крови никак не связано с интенсивностью заболевания.

Делается анализ ПЦР и в случае интерфероновой терапии, чтобы назначить продолжительность и сложность лечебного курса.

Особенности качественного ПЦР анализ на гепатит С

Назначается качественный анализ с показателем полимеразной цепной реакции всем пациентам, у кого в крови обнаружены антитела к гепатиту С. Кто переболел и выздоровел, должен повторно пройти тестирование.

Рекомендуется сдать анализ и на гепатит В, затем, в случае положительного заключения, и на гепатит D. Также качественно анализированная реакация должна проводиться в комплексе с другими анализами крови.

Анализы покажут полную картину вирусного распространения.

Из результатов теста будет виден только положительный анализ на гепатит С или же отрицательный, то есть наличие или отсутствия вируса. Если в выводе стоит «обнаружено», значит, вирус есть и продолжает активно действовать.

Обозначение «не обнаружено» говорит об отсутствии вируса или его маленьком количестве.

При таком показателе следует учитывать то, что аналитическая чувствительность диагностических систем разная и РНК гепатит С все же может находиться в крови, но не проявиться в анализе.

Особо чувствительный метод ПЦР ультра гепатит С выявляет даже в мизерных количествах. Используется гибридизационно-флуоресцентное исследование, которое во много раз выше, чем стандартные системы ПЦР. Метод применяют в нескольких случаях:

  • подозреваются скрытые формы гепатита С;
  • диагностика ПЦР не подтвердила возбудитель, но антитела есть;
  • в случае выздоровления;
  • для выявления ранней стадии заражения.

Расшифровка анализа

Определение РНК вируса гепатита С методом полимеразно-цепной реакции.

На окончательное решение при постановке диагноза влияет ПЦР расшифровка ВГС, в частности, при ультраметоде.

Основной недостаток такого исследования — строгое соблюдение стерильных условий для образца и материалов. Небольшое отклонение иногда показывает неточные выводы аналитики, усложнит постановку диагноза и последующее лечение.

Анализ ПЦР на определение РНК вируса гепатита не всегда уверенно показывает картину заболевания, иногда допускаются неточности, причем в обе стороны.

Диагностируя вирус гепатита, рекомендуется применять комплексное обследование.

Отсутствие в результатах исследования антител JgM к РНК вирусному гепатиту С считается нормой при анализе полимеразной цепной реакции.

В то же время выводы серологического анализа указывают на присутствие антител к вирусу С и это также в пределах нормы.

Качественное определение не показывает интенсивность заболевания, оно только выявляет возбудитель гепатита С в РНК. Такой анализ повторяют и после лечения, чтобы подтвердить действительное выздоровление.

Отклонения

Если антитела JgM к РНК ВГС присутствуют, это говорит о развивающемся заражении. Заболевание при этом протекает остро или хронически, проявляется в разных стадиях.

Если зафиксировано уменьшение количества антител, то анализ будет свидетельствовать о достижении результатов лечения в ходе выздоровления. Встречаются в диагностике исключительно редкие случаи ложноположительных выводов.

Они обнаруживаются у женщин при беременности и у людей с другими инфекционными болезнями.

Источник: http://InfoPechen.ru/gepatity/diagnostika/ptsr-na-gepatit-c.html

Что такое ПЦР анализ и вирусная нагрузка?

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Важно! Найдено уникальное средство для борьбы с болезнями печени! Принимая его курсом можно всего за неделю победить почти любую болезнь печени! Читать далее >>>

Анализ ПЦР на гепатит – что это и зачем делают?

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

  • качественный;
  • количественный.

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

Качественный и количественный ПЦР

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

При болезнях печени нужно принимать..

Специальный препарат, основанный, на натуральных веществах

Цена на препарат

Отзывы о лечении

Не является лекарством. Требуется консультация специалиста. Эффективный способ очистки печени

Всего 1 раз в день, по 3 капли

Результаты лечения

Инструкция по применению

Не является лекарством. Требуется консультация специалиста.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

  • Генотип 1а, 1b, 1с
  • Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
  • Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
  • Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
  • Генотип 5 а
  • Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

  • отрицательный;
  • положительный.

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка при гепатите С

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

Что это?

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Какая считается высокой, какая низкой?

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в нормеэто когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Таблица вирусной нагрузки:

  • низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
  • средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
  • высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

Низкая вирусная нагрузка – это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

Внимание! Количественное тестирование проводится на протяжении всей антивирусной терапии: через 4, 12 и 24 недели, цель которой – снизить вирусную нагрузку.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Стоимость ПЦР диагностики

Для справки! Пройти диагностику на гепатит С или любое другое инфекционное заболевание можно по направлению врача или самостоятельно.

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

  • общая слабость;
  • изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
  • тошнота;
  • снижение аппетита;
  • боли в мышцах и суставах;
  • тяжесть в правом подреберье;
  • повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

  1. Широкий спектр применения. С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
  2. Точность определения возбудителя. Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
  3. Высокая чувствительность. Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
  4. Оперативность. Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
  5. Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

  • для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты, в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
  • высокие требования к персоналу, осуществляющему забор и анализ биоматериала.

Источник: http://ZaPechen.ru/bolezni-pecheni/gepatit/c/ptsr-analiz.html

Диагностика с помощью ПЦР на гепатит С

Диагностика с помощью ПЦР на гепатит С

Не все знают, для чего используют метод диагностики ПЦР на гепатит С. Одной из широко распространенных групп заболеваний являются инфекционные болезни органов желудочно-кишечного тракта. Чаще всего страдают желудок (язвы), кишечник (колиты, энтериты) и печень (гепатиты).

На печень среди всех вышеперечисленных органов возлагается наибольшая нагрузка. В организме роль печени крайне важна:

  1. Практически все реакции метаболизма протекают в печени (именно здесь образуются все виды жизненно необходимых компонентов, позволяющих организму полноценно функционировать).
  2. Печень является главным органом, осуществляющим детоксикационную функцию. С ее помощью (в частности, через желчь) производится удаление многих субстратов, способных вызвать интоксикацию и привести к тяжелым последствиям.

К сожалению, многие люди не следят за своим здоровьем, из-за чего начинает страдать печень. Обычно развиваются гепатиты различной этиологии (вирусные, токсические).

Определение гепатита

Вирусные гепатиты занимают важное место среди заболеваний печени. Тяжесть протекания заболевания, сложность лечения выносят их на первое место среди патологии другой природы этого органа.

Все гепатиты подразделяются на острые и хронические. К острым относят гепатит А и В. Среди хронических на первом месте гепатит С.

Данное заболевание вызывается вирусом гепатита С. Характерной чертой является то, что заболевание долгое время может протекать без каких-либо клинических проявлений.

Передается оно преимущественно через кровь. С током крови вирус заносится в печень, где начинает размножаться в ее клетках.

В результате накопления вирионов происходит разрушение зараженного гепатоцита. В ответ на это начинают вырабатываться антитела, которые начинают атаковать остатки гепатоцитов.

Из-за этого со временем нарабатывается пул против клеток печени, что усугубляет течение заболевания.

Из-за того, что болезнь протекает малосимптомно или бессимптомно, а клинические признаки появляются только при значительном поражении клеток, эта болезнь требует создания методов диагностики, позволяющих выявить ее наличие и принять соответствующие меры.

Диагностика гепатита С: качественный и количественный анализы

В настоящее время для диагностики гепатита С используются такие методы, как биопсия печени, иммунограмма.

Они позволяют непосредственно определить наличие пораженных гепатоцитов (исследование биоптата печени) или специфических антител против пораженных клеток (иммунограмма). Однако существует метод, который позволяет достоверно определить наличие самого вируса. Это ПЦР — полимеразная цепная реакция.

Суть этого метода заключается в том, что в определенных условиях происходит наработка цепей РНК. Это происходит из-за того, что в крови или исследуемом биоптате имеются фрагменты вирусной частицы.

При соединении их с некоторыми молекулами в среде происходит синтез цепей, комплементарных вирусной РНК.

При их последующем анализе и сопоставлении с известной нуклеотидной последовательностью вируса гепатита С удается выявить, имеется ли в организме данный вирус и присутствует ли поражение печени.

ПЦР проводится после выявления в крови специфических антител против вируса гепатита. После проведения теста выносится результат — РНК “обнаружено” или “не обнаружено”. Изредка он может гласить “недостаточно материала” — в таком случае необходим повторный анализ на гепатит С.

Если количество вирусных частиц меньше необходимого минимального количества, то можно говорить о том, что гепатита нет, а минимальные количества генетического материала могли быть “спутаны” из-за мимикрии генетического материала или некоторых последовательностей нуклеотидов, которые случайно смогли совпасть с таковой у вируса.

  1. При ПЦР отрицательный результат может наблюдаться, когда в самом деле имеются вирусные частицы в крови, однако их настолько мало (заражение произошло недавно или проведению анализа предшествовала длительная и интенсивная противовирусная терапия), что тест-система просто не смогла нормально определить их концентрацию. РНК — «не обнаружено».
  2. Если ПЦР имеет положительный результат, то вирусных частиц в крови наблюдается настолько много, что их количество превышает нижний порог чувствительности тест-системы. В этом случае высок риск развития инфекционного процесса (или он уже присутствует в довольно запущенной стадии). Обычно высокое количество вируса уже является показанием к лечению и последующей пересадке печени.

Иногда тест может становиться ложноположительным или ложноотрицательным.

Ложноотрицательный результат ПЦР гепатита наблюдается в том случае, когда в среде для проведения реакции присутствуют некоторые компоненты, которые ингибируют образование копий вирусной частицы.

Из-за этого не удается получить истинной картины состояния крови, что способствует пропуску вируса и прогрессированию заболевания. На реакцию может повлиять и присутствие в крови гепарина (за счет снижения относительной вязкости крови).

Неправильная интерпретация анализа возможна и тогда, когда не были соблюдены условия транспортировки и хранения исследуемого материала.

Ложноположительные результаты, когда диагностируется гепатит С, ПЦР чаще всего дает при загрязнении пробирки или рабочей среды. Кроме того, положительные результаты могут наблюдаться при наличии и вирусов гепатита других групп (за счет перекрестного реагирования).

Качественный анализ ПЦР на выявление гепатита С

Наличие в крови большого количества криоглобулинов тоже непосредственно влияет на проведение ПЦР. Из-за этого перед проведением анализа на гепатит С обязательно нужно определить в крови их концентрацию, чтобы выявить искажение результата заранее и предотвратить его.

После проведения указанных тестов становится понятно, имеются ли в крови вирусные частицы. При их определении рекомендовано немедленно начинать противовирусную терапию с целью замедления прогрессирования процесса.

В отличие от гепатита В, полного излечения от гепатита С не наблюдается; болезнь лишь переходит в латентную стадию и начинает протекать медленнее. Поражение печени при этом неизбежно.

На последней стадии процесса, когда печень уже не справляется со своей функцией, может потребоваться ее трансплантация.

Лечение проводится преимущественно двумя препаратами — интерфероном и рибавирином.

Доказана их эффективность в замедлении процесса поражения гепатоцитов. Попутно обязательно назначается инфузионная терапия с целью облегчения работы печени.

Все пациенты, у которых наблюдалось увеличение количества вирусных частиц в крови, обязательно находятся на учете у гепатолога. Несколько раз в год им рекомендуется проходить профилактический осмотр с целью определения прогрессирования процесса и своевременного выявления показаний к трансплантации.

Кроме того, можно использовать и гепатопротекторы, хотя мнения врачей несколько расходятся. Одни считают, что данные препараты позволяют приостановить процесс и защитить еще не пораженные гепатоциты; другие же убеждены, что толку от их приема нет и следует проводить интенсивную противовирусную терапию.

Таким образом, гепатит С относится к категории заболеваний, выявление которых составляет некоторые трудности. Совершенствование методов диагностики, а также своевременные профилактические осмотры позволят снизить частоту развития данного заболевания.

Немаловажной является и профилактика данной болезни. Следует тщательно избегать контактов с кровью, отказаться от приема наркотиков, только тогда это заболевание будет искоренено.

Главное в профилактике и лечении — сознательное отношение пациента к своему здоровью.

Источник: http://OGepatite.ru/c/pcr-na-gepatit-c.html

ПЦР-исследование на гепатит С: виды, показания, расшифровка

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты.

Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев.

Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

Что такое анализ ПЦР?

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса.

В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя.

С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Виды ПЦР-анализа на гепатит С

Различают три вида ПЦР-анализа:

  1. Качественный анализ ПЦР. Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.
  2. Количественный анализ ПЦР. Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.
  3. Генотипирование. Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.

Показания к ПЦР-анализу на гепатит С

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

  • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
  • положительный результат иммуноферментного анализа;
  • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
  • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
  • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
  • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
  • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
  • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
  • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровка ПЦР-исследования на гепатит С

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

Обнаружено В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.
Не обнаружено Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.
Не обнаружено Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.
До 1,8*102 МЕ/мл Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.
До 8*105 МЕ/мл Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.
Больше 8*105 МЕ/мл Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.
Больше 2,4*107 МЕ/мл Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.
Обнаружена РНК определенного генотипа В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.
Обнаружена РНК вируса гепатита С В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.
Не обнаружено Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

  • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
  • образец биоматериала был загрязнен;
  • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
  • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Преимущества ПЦР перед другими методами

  1. Диагностика на ранних стадиях. ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию.

    В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.

  2. Низкая вероятность ошибки.

    В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.

  3. Высокая чувствительность. ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

  • анализ крови сдают с утра;
  • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
  • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
  • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

Источник: https://hepatit.care/hepatits/gepatit-s/ptsr-issledovanie-na-gepatit-s-vidy-pokazaniya-rasshifroa.html

Расшифровка качественного анализа ПЦР на гепатит С

Расшифровка качественного анализа ПЦР на гепатит С

Специальное лабораторное исследование — анализ пцр на гепатит с — значительно упрощает диагностику этого вирусного заболевания. Исключением не является и гепатит С.

Небольшая по объему проба крови может быть проверена на содержание рнк и другой генетический материал вирусного агента.

Анализу с проведением пцр подвергаются все лица с циркулирующими в плазме крови антитела к гепатиту С, наличие которых подтвердило качественное обнаружение.

Расшифровка результатов интерпретируется в графе бланка исследования как «положительный» или «отрицательный» анализ. Кроме этого, с помощью пцр возможно не только качественно определить минимальное содержание вируса, но и подсчитать число частиц. Таким образом, можно определить предполагаемую вирусную нагрузку и максимально точно определиться с врачебной тактикой лечения.

Вирусное поражение печени

Печень как элемент пищеварительного тракта принимает на себя огромную нагрузку. В ее клетках происходит большинство метаболических реакций всех видов обмена, что обеспечивает оптимальное функционирование всех органов и систем. В тоже время велико ее детоксикационное значение для выведения шлаков и продуктов обмена с ферментативной желчью.

Поражение печени вирусами различной природы чрезвычайно опасно для органа. Разнообразная клиническая картина и неподатливость лечению выводит гепатиты на первое место по опасности для здоровья.

Гепатит С носит хронический характер и долгое время может давать отрицательный результат тестирования, медленно паразитируя в организме человека. Передается вирус через биологические жидкости: кровь и реже через сперму.

Наркотическое злоупотребление нестерильными шприцами, естественное родоразрешение зараженных женщин, случайные травмы или порезы медработников могут повлечь передачу вируса здоровым людям.

Своевременная диагностика заболевания затрудняется скрытой клинической картиной и бессистемностью патологии. Положительный результат может быть просто упущен некачественным выполнением анализов. Только значительное поражение клеток печени вызывает определенную симптоматику, однако, отрицательный эффект виремии к тому времени не оставляет шансов восстановить орган.

Современная медицина разработала специальные методы распознавания малейших следов вируса. Пцр, ифа, биопсия печени позволяют распознать малейшее повреждение печени и минимальный уровень антител против вируса. Анализ cпомощью пцр наиболее прост и достоверен в диагностической практике.

Качественный анализ

Суть полимеразной реакции заключается в наработке последовательности рнк. Реакция выполняется при наличии в плазме крови таких же вирусных белков.

Специальные катализаторы позволяют синтезировать сходную вирусной последовательности цепь, которую сравнивают с известными нуклеотидами вирусной рнк. На основе этого и определяют вирусную нагрузку и поражение печени.

Исследование методом ПЦР открывает больше информации, чем простое обнаружение рнк вируса. Она превосходит по чувствительности некогда стандартные методы ифа и другого вирусного выделения в несколько раз.

Пцр способна уловить даже единичное присутствие искомого гена во взятой крови. Такая диагностическая цепная реакция также весьма специфична.

Последовательность нуклеотидных цепей уникальна для каждого существа, так что ферментативные праймеры создают идентичные последовательности искомой генетической информации.

Таким образом, можно с малейшей точностью выявить любой вирус, даже если его количественный показатель чрезвычайно мал.

Пациентам, в крови которых были обнаружены выработанные антитела против вирусного гепатита, проводят качественное исследование пцр или ифа. Результат анализа может быть как положительный, так и отрицательный, что в обоих случаях требует лечения.

Расшифровать положительный ответ цепной реакции следует как наличие фрагментов рнк гепатитного вируса или как явление инфицирования.

В плазме крови в данный момент вирус активно размножается и паразитирует над клетками печени.

Пцр-диагностика может дать отрицательный ответ в случае, если частиц вирусной рнк присутствует в плазме мало, ниже уровня чувствительности теста или их вовсе нет.

После непосредственного заражения количество вируса нарастает сравнительно медленно, и только спустя 1–2 недели ифа или другое качественное исследование способны их выделить.

Отрицательный анализ можно получить и в следующих случаях:

  1. При взятии материала в ненадлежащих условиях, получении пробы крови с загрязнениями;
  2. При ранее произведённых пациенту инъекциях гепарина.
  3. При присутствии во взятых образцах других ферментов и субстратов, нарушающих ход цепной реакции.

Количественный анализ

Количественный тест как микробиологическая диагностика призван определять вирусную нагрузку.

Подтвержденный качественный анализ на виремию служит основанием для определения количества генетического материала и его концентрации. Число выявленных вирусных рнк определяют в единице объема крови, обычно в 1 миллилитре.

Искомые материалы выражают в международных единицах, некоторые лаборатории в анализах ифа используют количество копий.

Обычно до проведения любой терапевтической схемы проводится количественный анализ пцр. Подсчет вирусных рнк проводят достаточно часто: спустя одну, четыре, двенадцать и двадцать четыре недели. 12-ая неделя считается показательной, так как на основе анализа в этот период проводится расшифровка эффективности лечебных мероприятий.

Любое проведение исследований не требует тщательного подготовительного этапа пациентов. Единственное, что запрещается до взятия крови – курение.

Количественный анализ с помощью пцр или ифа предполагает взятие проб из вены.

Интерпретация результатов как высокая вирусная нагрузка начинается от цифры в 800000 МЕ/мл. Такой положительный результат на гепатит С отражает наличие не менее 3000000 копий в одном миллилитре крови. Низкий уровень виремии останавливается на цифре в 400000 МЕ/мл. Результатами исследования могут быть значения как отрицательный ответ, а также показатель «ниже измерительного диапазона».

Количественный тест с оценкой «ниже диапазона измерений» говорит, что в ходе реакции не удалось произвести подсчет рнк. Вирус же в организме все же циркулирует, на что указывает положительный качественный тест. Отрицательный показатель количественного анализа пцр или ифа свидетельствует об отсутствии рнк в данной пробе крови.

Вирусная нагрузка позволяет расшифровать степень инфекционности патологии и опасность пациента для окружающих. Высокий уровень вирусных рнк, выявленных в ходе пцр или ифа, говорит о риске «заразности» больного.

Несмотря на ограниченные способы передачи вируса через кровь, повышается риск передачи вируса через секреты половых желез, от матери к ребенку.

Количественный анализ оказывает существенную помощь в оценке терапевтических мероприятий. Ифа и пцр отражают действие противовирусных лекарственных средств, помогают установить сроки терапии и оценить формирование иммунитета больных. Скорый отрицательный ответ лабораторных тестов свидетельствует об успешном лечении и необходимости сократить сроки терапии.

Медленное снижение показателей виремии можно расшифровать как необходимость видоизменения терапевтического курса. Уровень вирусной нагрузки определяет и прогноз заболевания. Гепатит с низким данным показателем, скорее всего, будет просто лечить и можно полностью вывести вирус из организма.

Высокие показатели вирусного присутствия в крови требует внимательного отношения и разностороннего лечения.

Рекомендуем прочитать:

Источник: http://pechen1.ru/gepatit/c/analiz-ptsr.html

Поделиться:
Нет комментариев

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.

×
Рекомендуем посмотреть